四君子汤中化学成分的含量测定

四君子汤源出《和剂局方》。为了研究四君子汤的有效部分或有效成分,我们在系统分析的基础上,对其所含的黄酮类化学成分进行了含量测定。一、分析材料四君子汤:党参5g、白术5g、茯苓5g、甘草2.5g,4种药材均购自北京市药材公司,经鉴定均为我国药典收载品种。标准品:芸香甙(含量95％),上海试剂二厂。二、系统分析将4种药材水煎30min,乘热过滤。滤液于水浴上浓缩至膏状。按常法进行系统分析,结果显示含有糖类、黄酮类、萜类、酚羟基化合物,以及微量生物碱、挥发油等成分。三、黄酮类化合物的含量测定 1.标准曲线的制备:精密称取芸香甙适量,以     

中医临床诊疗指南制修订现状调研、分析与工作建议

背景 2014年底,国家中医药管理局政策法规与监督司开展中医临床诊疗指南制修订工作,对中医13个专科领域的240项中医临床诊疗指南项目进行制修订,中华中医药学会承担本部分工作。目的 为了解中医领域临床诊疗指南制修订现状,从方法学角度对项目组工作中存在的问题进行分析并给出建议,本项目组对中华中医药学会中医临床诊疗指南制修订项目组进行调研。方法 2020年6—12月,以中华中医药学会中医临床诊疗指南制修订项目组为调研对象,每个项目组人员填写一份问卷,汇集项目组整体意见。采用问卷星电子问卷,通过中华中医药学会工作文件的方式下发通知至各项目组进行调查,网络端收取调查结果。围绕调研主题,问卷内容包括5大方面：对中医临床诊疗指南的认识、指南制修订程序和方法学应用、指南制修订工作重点问题和关键环节、指南实施推广和应用情况、指南制修订工作情况整体调研。问卷为半结构化设计,共30个结构化问题、4个开放性问题。调研完成后对结果进行数据汇总与描述性分析。结果 本调研最终收回有效问卷198份,调研结果提示,在对中医临床诊疗指南的认识上,大多数项目组（94.45%,187/198）认为本领域内依然需要更多的中医...     

糖尿病大鼠创面愈合过程中成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成减少

目的：观察链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病复合创伤修复过程中成纤维细胞增殖与胶原合成的变化。 方法： 实验采用Wistar大鼠112只，随机分对照组和模型组。模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）55 mg/kg，3周后各组动物复合背部2.04 cm²全厚皮切除形成伤口。观察创面愈合时间和愈合率；采用HE染色和免疫组化法观察成纤维细胞和增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平；采用苦味酸-天狼星红染色和图像分析技术观察创面Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及Ⅰ/Ⅲ型比值。 结果： STZ诱发的糖尿病大鼠复合创伤后创面的愈合时间为(27.13±1.81)d，明显长于对照组（15.25±1.67）d，P<0.01；模型组在创伤第3、7和15 d创面愈合率明显低于对照组，分别P<0.01；在3、5、7和9 d模型组创面成纤维细胞数量和PCNA表达也明显少于对照组，分别P<0.05和P<0.01。两组创面在不同时点上Ⅰ型胶原分布均呈递增趋势，但对照组明显多于模型组，分别P＜0.05；尽管对照组在创伤3、7 d Ⅲ型胶原含量高于模型组，但在创伤3、7和11 d模型组Ⅰ/Ⅲ胶原比值都明显低于对照组，分别P＜0.01。 结论： STZ可能通过影响创面细胞增殖和创面胶原合成，从而导致创面愈合迟缓。     

三氧化二砷对皮肤成纤维细胞、中性粒细胞MMPs活性,TIMP-1及TGF-β1表达的影响

目的：砒石是化腐生肌的常用中药，其主要成分是三氧化二砷（As₂O₃）。本研究通过观察As₂O₃对基质金属蛋白酶（MMPs）活性、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）及转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达影响，探讨化腐中药能否调节胶原代谢，从而治疗慢性皮肤溃疡。方法:明胶酶谱法检测大鼠中性粒细胞（PMNs）来源的MMP-9活性、人成纤维细胞（hFb）分泌的MMP-1、MMP-2的活性，免疫细胞化学法检测hFb TIMP-1、TGF-β₁的表达。结果:As₂O₃浓度在50 mg/L时可以提高大鼠PMNs来源的MMP-9的活性（P<0.01）；在0.8 mg/L可以提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性（分别P<0.01）；同时As₂O₃作用于hFb 6 h、12 h、18 h后，TIMP-1、TGF-β₁表达持续降低（P<0.01）。结论:As₂O₃在一定范围内可提高PMNs来源的MMP-9的活性；也可提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性，同时抑制hFbTIMP-1、TGF-β₁的表达。提示砷类制剂可通过提高多种MMPs的活性，降低TIMP-1的表达从而发挥化腐作用。     

慢性皮肤溃疡的局部证型与炎性细胞的关系

目的 :通过观察CD6 8、CD3、CD15和CD2 2在慢性皮肤溃疡创面组织中的表达和分布 ,探讨慢性皮肤溃疡创面局部辨证与炎症反应的关系。方法 :12例慢性下肢皮肤溃疡患者 ,中医辨证分为气阴两虚型 5例、湿热下注型 7例。切取溃疡创面及周围正常皮肤组织 ,常规切片HE染色观察创面病理学改变。 2步法免疫组织化学技术观察CD6 8、CD3、CD15和CD2 2在溃疡组织的不同表达和分布。选取 3个高倍视野 ,计数阳性细胞 ,0个为 (- ) ,1- 5个为 (+) ,6 - 10个为 (++) ,大于 10个为 (+++)。结果 :溃疡组织切片HE染色观察创面局部呈典型的慢性溃疡组织学…     

低营养及低氧状态下NIH3T3细胞增殖及细胞周期的变化及对bFGF的影响

目的： 体外模拟慢性创面缺氧、低营养环境，观察成纤维细胞在该状态下增殖及细胞周期的变化及对外源性生长因子（bFGF）的反应,探讨低氧、低营养条件下成纤维细胞的病理生理变化。方法: 单纯缺氧环境采用厌氧培养箱，通入混合气，氧分压（PO₂）分为27 mmHg和44 mmHg 2个水平；低营养环境则控制培养液新生牛血清（NCS）浓度。用MTT法检测细胞活性以及其对外源性生长因子的反应，用流式细胞仪检测细胞周期。结果: PO₂ 44 mmHg时细胞增殖速度较同期对照组无明显差异；PO₂ 27 mmHg时，细胞增殖速度较同期对照组明显减慢（P<0.01），细胞被阻滞于G₀期，S期细胞比例明显减少，bFGF未显示促增殖作用。NCS浓度为0.5%的低营养状态下细胞增殖速度较同期对照组明显减慢（P<0.01），细胞被阻滞于G₀-G₁期（P<0.01）；bFGF能明显改善低营养状态下的增殖减慢（P<0.01），使G₂-M期细胞比例增加（P<0.05）。结论: 27 mmHg PO₂或NCS浓度为0.5%的低营养环境使细胞阻滞于G₀-G₁期，影响成纤维细胞增殖；bFGF可以改善低营养条件下细胞增殖减慢的状态，但对极度缺氧条件下的成纤维细胞增殖障碍无明显作用。     

中医药随机对照试验中采用真实世界数据作为对照组的研究设计及挑战

在设计随机对照试验（RCT）时,如果对照组存在患者招募和入组困难的情况,就会影响试验整体实施。近年来,真实世界数据（RWD）作为除RCT之外的数据来源,在医疗领域中发挥着越来越重要的作用。中医药RCT中可以尝试采用将RWD作为对照组的研究设计,不仅可以有效解决中医药RCT西医对照组患者入组困难的问题,同时能提供有力证据来评价中医药的疗效。倾向评分法目前已广泛应用于真实世界研究中混杂因素的处理,该文对RCT采用RWD作为对照组的这类设计中,基于倾向评分法常见的4种研究设计形式以实例分别进行了介绍,包括不对称随机分配、基于倾向评分分层法的两阶段设计、倾向评分联合复合似然法及倾向评分多种方法的联合。同时,这种设计类型也存在着方法学的挑战,包括RWD数据源必须是高质量且关键信息需要规范收集、RCT和RWD患者基线特征应该具有可比性、协变量选择时需要把所有已知与干预措施和结局相关的协变量都纳入进行分析等。在中医药领域采用这种设计时,还存在着有些RWD中医证型信息缺失、中医结局指标缺失等问题,在使用RWD时,需要根据数据实际情况决定如何分析。该文对以RWD作为RCT对照组的设计类型及面临的方法学挑战进行了介绍,期望能为研究者今后使用这类设计提供方法学借鉴。     

参元丹治疗不稳定心绞痛的临床与实验研究

目的 :对比益气破血法组方的中药参元丹与合心爽治疗不稳定心绞痛 (UA)血瘀证的临床疗效 ;观察参元丹对去氧肾上腺素 (PHE)诱发家兔主动脉环组织痉挛的拮抗作用及其与血管内皮的关系。方法 :临床入选患者均为不稳定心绞痛常规药物治疗未能控制而住院的患者 ,符合WHO标准 ,并有心绞痛发作时心电图动态变化证据 ;维持原来抗心绞痛西药不变 ,随机分组 ;治疗组以参元丹煎剂治疗 ,对照组采用合心爽治疗。实验研究采用家兔离体主动脉环灌流的方法 ,以PHE诱发组织肌条痉挛 ,观察参元丹对PHE的拮抗作用及其是否具有动脉血管内皮依赖。同时观察参元丹拮抗PHE引起家兔主动脉环收缩的剂量反应关系。结果 :参元丹及合心爽对UA血瘀证患者均有较好的临床效果 ,两者在缓解心绞痛方面疗效相近 ,参元丹组在证候积分下降方面优于合心爽组。参元丹对内皮完整及去内皮家兔主动脉环PHE引起收缩均有拮抗作用 ,对内皮完整动脉环作用明显强于去内皮动脉环 ,其作用明显强于香丹注射液及黄芪注射液 ;此作用存在量效关系。结论 :参元丹治疗UA血瘀证方面可能独具优势 ,可以更好地提高UA血瘀证患者的生活质量。参元丹具有拮抗PHE引起的血管平滑肌收缩作用 ,可能是其重要的疗效基础 ,其作用部分需要内皮功能参与。     

健脾益气和胃法防治大鼠胃缺血再灌注损伤的实验研究

目的:探讨大鼠胃缺血后再灌注胃粘膜损伤与氧自由基脂质过氧化的相关性及以健脾益气和胃法防治其胃粘膜损伤的细胞保护作用机制。方法:采用腹腔动脉结扎法,造成胃缺血20min,解除结扎,再灌注60min 后,取出胃粘膜,观察正常对照组、病理模型组和用药各组中胃粘膜之氧自由基脂质过氧化物及清除酶系诸指标的变化。结果:大鼠胃缺血后再灌注,胃粘膜脂质过氧化物(LPO)含量比正常对照组明显增加,超氧化物歧化酶(SOD)、非蛋白巯基(NPSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量则明显降低(P<0.01);术前口服健脾益气和胃中药各组胃粘膜 LPO 含量明显低于病理组,SOD、NPSH、GSH-Px 水平则明显高于病理组(P<0.05,P<0.01);而过氧化氢酶(CAT)和前列腺素 E_2(PGE_2)在实验各组的比较无统计学意义(P>0.05)。结论:氧自由基脂质过氧化参与胃缺血再灌注的胃粘膜损伤过程,健脾益气和胃法的治疗对胃缺血再灌注损伤具有保护作用。此作用可能是通过抑制氧自由基过氧化损伤,提高胃粘膜 SOD、GSH-Px、NPSH 活性,增强其抗氧化能力而实现的。     

健脾促动颗粒提取工艺研究

目的：确定健脾促动颗粒的提取工艺。方法：以挥发油得率、水提液出膏率和总黄酮含量、正丁醇浸出物量为指标，选择挥发油的提取、包合条件及水提液的精制条件。结果：加水10倍量、浸泡3h的挥发油得率高；挥发油包合时其与β-CD的配比为主要影响因素；水提液醇沉浓度为70％时出膏率低而总黄酮含量和正丁醇浸出物含量高。结论：提取挥发油条件为加水10倍量、浸泡3h后提取8h；挥发油包合条件为油：β-CD：水=1：6：100，50℃搅拌2h；水提液的醇沉浓度为70％。